在一项研究中,研究人员旨在从幽门螺杆菌的病原体中找出定植者,以便制定适当的治疗计划。幽门螺杆菌是一种与各种胃病有关的细菌,包括急性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌和 MALT 相关淋巴瘤。虽然正常人也会发生定植,但如果该病菌与毒力因子(如分别由 vacA 和 cagA 基因编码的空泡毒素和细胞毒素)相关联,则需要进行治疗。
保存幽门螺杆菌样本时使用了什么培养基?
研究期间,从每位患者身上采集了四份胃活检样本,并保存在不同的培养基中进行各种分析。使用的培养基包括Cary-Blair氏运送培养基、10% 福尔马林、Tris-EDTA 缓冲液和 10% 尿素肉汤。每种培养基在幽门螺杆菌的鉴定和特征描述中都有特定的作用。
每种培养基发挥什么作用?
1. Cary-Blair氏运送培养基:这种培养基用于细菌培养和幽门螺杆菌的分离。组织样本在Cary-Blair培养基中均质,然后接种到Bacto Campylobacter琼脂试剂盒Skirrow(Difco)中,用于幽门螺杆菌的选择性生长。
2. 10%福尔马林:用 10%福尔马林保存的组织样本用于组织病理学检查。石蜡切片用苏木精-伊红、Giemsa 和甲苯胺蓝染色,以研究组织形态、炎症细胞以及是否存在类似幽门螺杆菌的弯曲S型细菌。
3. Tris-EDTA缓冲液:样本在 Tris-EDTA 缓冲液中进行 DNA 提取和随后的 PCR 分析。采用旋柱法提取 DNA,并进行多重 PCR,以检测 16SrRNA、vacA 和 cagA 基因的存在,这些基因是幽门螺杆菌鉴定和致病性的特异性标记。
4. 10% 尿素肉汤:将组织样本放入含有酚红 pH 指示剂的 10% 尿素肉汤中,进行快速尿素酶测试。如果在 30 分钟内颜色变为粉红色,则表明幽门螺杆菌具有很强的尿素酶活性。
用于 PCR 分析的液体是什么?
在 Tris-EDTA 缓冲液中收集的组织用于 DNA 提取和随后的 PCR 分析。使用 QIAGEN 试剂盒中提供的溶液,采用旋柱法提取 DNA。然后对提取的 DNA 进行多重 PCR 分析,以检测是否存在幽门螺杆菌特异的 16SrRNA 基因以及毒力因子 vacA 和 cagA 基因。
为什么 PCR 分析至关重要?
PCR 分析在区分共生幽门螺杆菌菌株和潜在致病菌株方面发挥了关键作用。vacA 和 cagA 基因分别编码空泡毒素和细胞毒素,它们的存在表明幽门螺杆菌具有较高的致病性。通过检测这些毒力因子,研究人员可以区分无害的旁观者和潜在的入侵生物,从而帮助做出适当的治疗决定。
运输培养基对研究有何贡献?
使用不同的运输培养基可以对幽门螺杆菌的检测和特征进行全面分析。Cary-Blair氏运送培养基有利于细菌培养和分离,从而可以进行抗生素敏感性测试并进一步确定分离物的特征。福尔马林固定样本有助于了解与幽门螺杆菌感染相关的组织病理学变化。Tris-EDTA 缓冲液可保持 DNA 的完整性,以便进行 PCR 分析,从而检测与致病性相关的特定基因。尿素肉汤支持快速尿素酶测试,这是一种广泛使用的幽门螺杆菌筛查方法。
通过使用这些不同的转运培养基,研究人员可以利用多种诊断方法,包括培养、组织病理学、血清学和分子技术,来全面评估幽门螺杆菌感染及其相关致病因素。这些方法的整合有助于加深对疾病动态的了解,并有助于区分定植者和潜在病原体,最终为治疗策略提供依据。
通过将麦瑞科林Cary-Blair运送培养基纳入幽门螺杆菌培养方案,您可以提高结果的准确性和可靠性,同时降低传统运输方法的复杂性。采用这种先进的解决方案,为更好地了解和管理幽门螺杆菌感染开辟新的可能性。
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