诺如病毒是一种传染性极强的病毒,可引起肠胃炎,即胃肠发炎。症状包括恶心、呕吐、腹泻和腹部绞痛。检测诺如病毒的存在对于控制其传播和采取适当措施至关重要。
收集诺如病毒样本的常用方法
1. 粪便样本: 这是检测诺如病毒的首选样本,收集至少 5 克含有病毒的粪便,放入干净、无菌和干燥的容器中进行检测。
2. 直肠拭子: 虽然直肠拭子可用于检测,但其灵敏度低于粪便样本,而且更容易出现假阴性结果。因此,临床上较少使用。
3. 呕吐物样本: 收集至少 5 克含有病毒的呕吐物,放入干净、无菌、干燥的容器中进行检测。
4. 水样: 如果怀疑诺如病毒疫情是通过水传播的,则收集至少 1 升水进行检测。
5. 环境拭子: 诺如病毒可在厨房台面、马桶、门把手和玩具等表面检测到。用无菌棉签擦拭这些表面,然后将棉签放入缓冲溶液中进行检测。
更详细采样方法可以参考《诺如病毒采样方法有哪些》这篇文章。
检测诺如病毒感染的方法
诺如病毒是一种传染性极强的病毒,可导致急性肠胃炎。快速准确地检测诺如病毒对控制其传播和有效治疗患者至关重要。目前已开发并采用了多种方法来检测诺如病毒:
反转录聚合酶链反应(RT-PCR): 这种方法灵敏度高、特异性强,被认为是检测诺如病毒的 “黄金标准”。RT-PCR 可扩增并检测粪便、呕吐物或环境拭子等临床样本中的病毒 RNA 基因组。
实时 RT-PCR: 这种定量技术使用荧光探针或染料对 PCR 扩增进行实时监测。TaqMan 和 SYBR Green 检测法常用于灵敏、特异的诺如病毒定量分析。
多重 RT-PCR: 这种方法在一次反应中使用多组引物,可同时检测不同的诺如病毒基因群或基因型,从而减少时间和成本。
环路介导等温扩增(LAMP): LAMP 是一种等温核酸扩增技术,可使用 4-6 种专门设计的引物在恒温(60-65°C)下快速扩增诺如病毒 RNA。最近的创新技术将 LAMP 与便携式血糖仪结合起来,用于现场检测诺如病毒。
巢式 PCR: 这种两步 PCR 通过连续使用两组引物来提高灵敏度,但需要大量人力。
微阵列: 这种方法将许多探针固定在固体支持物上,通过杂交同时检测多种病毒(如诺如病毒)。
酶联免疫吸附试验(ELISA): 商用酶联免疫吸附试剂盒使用特异性抗体检测诺如病毒抗原,但灵敏度可能低于分子方法。
免疫层析检测法(ICA): 使用抗体从样本中捕捉诺如病毒抗原的侧流试验可提供快速的现场检测,但灵敏度有限。
虽然 RT-PCR 仍是黄金标准,但 LAMP 和微阵列等技术在快速、灵敏和高通量诺如病毒筛查方面前景广阔。方法的选择取决于环境、资源可用性和性能要求。结合多种技术的多目标方法可提高整体检测能力。
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