在过去的半年时间里，我们经历了一场新型冠状病毒的感染，随后紧接着又是甲型流感的袭击，刚刚平息不久又迎来一波呼吸道合胞病毒感染。对于新冠和甲流大家都不再陌生，那么对于呼吸道合胞病毒，我们又了解多少呢？今天就和大家一起聊一聊呼吸道合胞病毒感染。
呼吸道合胞病毒概述
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)属于副黏病毒科，肺炎病毒亚科，肺炎病毒属。RSV和其他肺炎病毒与副黏病毒科病毒的区别主要在于基因的数量和排序不同，以及凝血素和神经氨酸酶活性的缺失。该病毒于1956年首次从感冒的黑猩猩身上分离出来，并于1957年利用细胞培养技术在肺炎患儿的呼吸道分离出了该病毒。目前只鉴定出一种RSV血清型，根据两个主要的抗原组可将其分为A、B两种亚型。RSV病毒颗粒大体上呈球状，但在低温电子断层扫描观察发现其形态具有多态性——球装、丝状或两者兼有。
RSV流行病学和传播
RSV主要通过飞沫传播、直接或间接接触感染者的分泌物或污染物来进行传播。有研究显示：在温带气候下，低温和高湿的环境中能明显增加RSV的活性。在全球范围内，RSV感染全年均可发生。根据流行病学数据显示：在同一地区同一季节，RSV的A、B型会交替流行。
RSV感染临床表现
RSV是引起婴幼儿急性下呼吸道感染的最主要病原体。临床症状主要包括：咳嗽、低烧和流涕等上呼吸道感染症状。常见的下呼吸道感染包括：支气管炎、细支气管炎和肺炎。对RSV病毒的相关研究汇总分析估计：2015年，全球由RSV引起的急性下呼吸道感染的5岁以下儿童有3310万，320万相关住院，56000例院内死亡。2019年，全球由RSV引起的急性下呼吸道感染的5岁以下儿童有3300万，360万相关住院，26300例院内死亡。其中95%的RSV引起的急性下呼吸道感染发病和97%的RSV引起的急性下呼吸道感染相关死亡发生在中低收入国家。而且，RSV在5岁以下儿童中的疾病负担是流感的2-3倍。
对于成人，RSV引起严重感染的危险因素主要有：患心肺疾病的人群（如慢阻肺、心脏病、哮喘等）以及免疫力受损的患者（如肿瘤和移植患者）。
RSV实验室检测项目有哪些？
那么诊断RSV感染可以做哪些实验室检查呢？RSV病毒感染呼吸道上皮细胞，可在所有类型的呼吸道分泌物中发现。通常，各种上呼吸道标本即可用于RSV病毒的检测。目前南院检验科常用的RSV病毒实验室检测项目有：呼吸道合胞病毒抗原检测（胶体金法）；七项呼吸道病毒抗原检测（免疫荧光法）；甲型、乙型流感及呼吸道合胞病毒核酸联合检测；13种呼吸道病原体多重检测。
一、呼吸道合胞病毒抗原检测（胶体金法）
呼吸道合胞病毒抗原检测是利用能够特异性识别呼吸道合胞病毒F蛋白的单克隆抗体，以胶体金免疫层析法检测呼吸道合胞病毒，且仅对标本中呼吸道合胞病毒A型和B型有特异性反应。本方法优点是：可快速检测呼吸道合胞病毒，可作为呼吸道合胞病毒感染的辅助诊断。局限性是：阴性结果不能排除流感病毒感染；阳性结果不能确定病毒亚型。
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二、七项呼吸道病毒抗原检测（免疫荧光法）
该检测方法使用荧光直接标记的病毒抗原特异性的鼠单克隆抗体，快速筛查7种常见的呼吸道病毒，包括：流感病毒A，流感病毒B，副流感病毒1，2，3，呼吸道合胞病毒以及腺病毒。利用荧光显微镜观察结果，阳性细胞显示苹果绿荧光；阴性细胞被Evans Blue 染成红色。
三、甲/乙型流感及呼吸道合胞病毒核酸联合检测（Xpert Xpress Flu/RSV Assay）
Xpert Xpress Flu/RSV Assay 用于体外定性检测甲型流感病毒、乙型流感病毒和RSV病毒RNA。GeneXpert全自动医用PCR分析系统是整合样本提取、核酸纯化和扩增、实时逆转录PCR（将RNA模板转化为DNA）、临床样本的靶序列检测等功能于一体的全自动分析系统。Xpert Xpress Flu/RSV Assay中的引物和探针用于扩增和检测编码以下蛋白基因的单一序列：甲型流感基质蛋白（M）、甲型流感碱性聚合酶（PB2）、甲型流感酸性蛋白（PA）、乙型流感基质蛋白（M）、乙型流感非结构性蛋白NS）、RSV A 和RSV B 核蛋白壳。GeneXpert全自动医用PCR分析系统包括仪器、个人计算机以及用于运行检测和查看结果的预装软件。每次检测都需要使用装有靶标特异性试剂的一次性GeneXpert试剂盒，来进行RT‐PCR和PCR过程。由于试剂盒是单独容器包装，因此可最大程度减少样本间的交叉污染。Xpert Xpress Flu/RSV Assay 包含用于检测和鉴别具有呼吸道感染体征和症状患者NP拭子中的甲型流感病毒、乙型流感病毒和RSV病毒RNA所需的试剂。试剂盒还包含样本处理质控（SPC）和探针检查质控（PCC）。SPC用于观察靶序列是否被正确提取或处理及监测PCR反应中是否存在抑制剂。PCC用于验证试剂再水化、检测盒中PCR管的灌装、探针完整性和染料稳定性。本实验可快速鉴别患者感染的季节性病毒类型。
四、13种呼吸道病原体多重检测
该项目的实验原理为：针对目标靶点设计特异性引物，采用多重PCR技术，在一个反应管中同时对多个靶点进行特异性扩增，最终通过毛细电泳分析，根据扩增片段长度的不同对特定的靶点进行区分。本项目检测的病原体包括：甲型流感病毒、甲型流感病毒H1N1、甲型流感病毒H3N2、乙型流感病毒、副流感病毒、鼻病毒、偏肺病毒、冠状病毒（不包括新冠病毒）、呼吸道合胞病毒、博卡病毒、腺病毒、肺炎支原体、衣原体。
面对呼吸道合胞病毒感染，上海市东方医院南院检验科开展了多种方法的病原学检测项目，为患者提供高质量医疗服务，临床医生可兼顾快速和敏感性两方面选择检测方法，这样有助于对患者的快速处置，选择合理的治疗方案，并有效控制病毒感染。
供稿：倪丽君、轩乾坤
审核：郭建
编辑：钟霓
