一、采样拭子场景注意事项
检验呼吸道病毒宜采用植绒拭子采集鼻咽标本。
普通拭子标本不宜用于厌氧菌培养。
外科手术标本,宜送液体或组织做涂片和培养,拭子标本仅用于特殊情况。
二、采样拭子选择
标本采集常用的拭子:
● 聚酯纤维、涤纶或人造丝头,柄部为塑料或铝的拭子:宜用于病毒学检验标本的采集。病毒学检验标本的采集不宜使用柄部为木质的拭子。
● 棉拭子:宜用于支原体检验的阴道、宫颈及尿道标本的采集,不宜用于细菌(特别是苛养菌)、衣原体检验标本的采集。
● 涤纶拭子和尼龙拭子:宜用于病毒和细菌标本的采样。
● 植绒拭子:由尼龙纤维经专有的喷雾技术制成,宜用于呼吸道病毒采样和真菌培养标本的采样。
● 藻酸钙拭子:宜用于衣原体和百日咳鲍特菌鼻咽拭子的采集。但不宜用于脂质包膜病毒及细胞培养的采样,不宜用于淋病奈瑟菌及解脲脲原体的采样。
三、采样拭子操作方法和注意事项
1、鼻咽拭子
(1)方法
● 请患者头部保持不动,去除鼻前孔中表面的分泌物;
● 通过鼻腔轻轻、缓缓插入鼻咽拭子至鼻咽部;
● 当遇到阻力后即到达后鼻咽,停留数秒吸取分泌物;
● 轻轻旋转取出拭子,置于转运培养基中;
● 用于病毒学检验的拭子,将拭子头浸入病毒运送液,尾部弃去,旋紧管盖;
● 用于细菌学检验的拭子,插回采样装置或适宜的转运装置中。
(2)注意事项
● 不推荐鼻咽拭子做普通细菌培养,特殊细菌除外,如百日咳鲍特菌、脑膜炎奈瑟菌。
● 若怀疑百日咳鲍特菌感染,需提前通知实验室,准备特殊的转运培养基(Regan-Lowe)。条件许可时可提供接种培养基,直接床旁接种后转运至实验室。
● 鼻咽拭子不能用于检验鼻窦炎的病原菌。
2、口咽拭子
(1)方法
● 请患者坐下,头后倾,张大嘴,去除鼻前孔中表面的分泌物;
● 采样者用压舌板固定舌头,用涤纶或藻酸钙拭子越过舌根到咽后壁及扁桃体隐窝、侧壁等处;
● 反复擦拭3~5次,收集粘膜细胞;
● 轻轻取出口咽拭子,避免触及舌头、悬垂体、口腔粘膜和唾液;
● 拭子插回采样装置中或适宜的转运装置中。
(2)注意事项
● 对化脓性咽炎,口咽拭子细菌培养主要用于筛查A群β-溶血链球菌和溶血隐秘杆菌;
● 当检验口咽拭子中的淋病奈瑟菌时,临床需提前告知实验室;
● 对于儿科患者,宜常规报告流感嗜血杆菌;
● 一般情况下,不单独选用咽拭子标本诊断上呼吸道感染,宜与鼻咽拭子或鼻咽吸取物联合检验以提高呼吸道感染的病原检出率。
3、粪便标本
(1)送检原则
● 在感染急性期采集腹泻粪便标本;
● 排除一些病原体的携带状态,需要连续3份标本阴性。若需要连续采集3份标本,则两次采集标本间隔48 h。
(2)方法
● 将粪便排入干燥清洁的便盆,避免使用坐式马桶或蹲式便盆。粪便标本中不宜混入尿液及其它异物,采集过程尽量无菌操作;
● 用粪便拭子挑取标本中异常部分(有粘液、脓液和血液的部分)2 mL~5 mL粪便悬液或2 g~5 g粪便标本置于无菌螺帽容器中,立即送检。
(3)标识
● 申请单上建议标注特殊病史。
(4)标本拒收
● 干燥的拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便或明显污染的粪便;
● 一天内重复送检的标本;
● 未使用运输培养基,采集后室温条件下超过2 h未送检的粪便;
● 使用运输培养基,4 ℃条件下保存超过 48 h或35 ℃条件下保存超过24 h未送检标本。
(5)注意事项
● 粪便标本常规不进行厌氧培养;
● 结肠造口术和回肠造口术标本的运输方式与粪便标本相同;
● 肠炎和发热病人宜同时送检血培养;
● 下列腹泻患者宜连续3天送检标本:社区获得性腹泻(入院前或72 h内出现症状)。医院获得性腹泻(入院72 h后出现症状),且至少有下列情况之一:大于65岁并伴有基础疾病、HIV感染、粒细胞缺乏症(中性粒细胞<0.5×109/L)及疑似院内暴发感染时。
4、直肠拭子和肛拭子
(1)送检原则
● 婴儿或重症患者腹泻时且暂时没有粪便,才可采集直肠拭子标本检验腹泻病原菌;
● 肛拭子不宜用于腹泻病原菌培养;
● 常规培养通常针对沙门菌属和志贺菌属,国际上还包括弯曲菌属。如果怀疑其他细菌感染,宜先咨询实验室。
(2)方法
● 无菌棉拭子用生理盐水湿润,轻轻地插入肛门括约肌上方(约6 cm~7 cm),旋转,取出,置于运输培养基中,拭子上可见粪便;
● 对于淋病奈瑟菌培养,采集肛环内的肛窦部位,尽量避免粪便污染;
● 立即将淋病奈瑟菌培养拭子置于运输培养基中, 或在患者床边接种。
(3)标识
● 在申请单上标注检査的病原菌, 尤其是怀疑淋病奈瑟菌感染时。
(4)注释
● 如果怀疑患者感染大肠埃希菌 O157:H7、耶尔森菌属、弧菌属、气单胞菌属或邻单胞菌属,宜通知实验室;
● 不宜使用拭子检验艰难梭菌毒素。
5、子宫颈内或宫颈标本
● 用温盐水湿润阴道窥器;
● 使用阴道窥器轻轻按压子宫,打开窥器,使用宫颈拭子采集分泌物。或者打开窥器,将拭子插入宫颈管1 cm~2 cm,转2 圈~3 圈采集分泌物,必要时停留20 s~30 s并转动取样;
● 怀疑淋病奈瑟菌时,可以同时采集直肠拭子与子宫颈标本。
6、男性泌尿生殖道标本
● 从尿道挤压分泌物,一根尿道拭子采集分泌物用于培养,保存于转运培养基中送检。另一根拭子采集分泌物用于涂片,将拭子在玻片表面滚动2 cm~3 cm。
● 若无分泌物,可将泌尿生殖道拭子插入尿道约2 cm,轻轻旋转取出。将标本尽快接种于特殊培养基,并置于35 ℃ CO2环境中培养。接种后的拭子制备涂片用于染色,最好采集两个拭子分别用于涂片和培养。
● 尿道分泌物革兰染色查到白细胞内革兰阴性双球菌可作为男性淋病患者的诊断依据。
7、眼科标本
(1)方法
● 结膜囊分泌物:将植绒拭子用病原体保存液或无菌生理盐水预湿,由内眦部开始从内到外旋转轻拭下方结膜囊和下睑结膜表面(注意内眦部), 采集后立即接种培养基或立即转运;接种后制备涂片,将拭子在载玻片上自内而外滚动涂成直径1.0 cm~1.5 cm的近圆形。
● 角膜及结膜刮片:由眼科专业人员采集,角膜刮片推荐用15号手术刀片刮取溃疡基底部、溃疡进行缘或损伤部位,将刮取物直接接种于培养基;睑结膜刮片宜翻转上睑暴露睑结膜,固定后,垂直刮擦组织。将刮取物直接涂抹于载玻片上,尽量均匀涂开。
● 房水及玻璃体液:由眼科专业人员采集,将无菌注射器中的标本直接接种于培养基或液体增菌培养基,常规进行苛养菌、真菌及厌氧菌培养,同时直接制片或甩片制片。
8、耳标本
(1)方法
● 取中耳标本时,若鼓膜完整,先用肥皂水清洁耳道,再行鼓膜穿刺术用注射器抽出中耳内液体;
● 取中耳标本时,若鼓膜穿孔,通过耳镜用软杆的采样拭子收集液体(仅限于需氧培养);
● 外耳道:用湿拭子将耳道的碎屑或硬皮除去,用一新拭子在外耳道用力旋转拭子取样。
9、皮肤、结缔组织及伤口标本
● 闭合性脓肿:消毒皮肤后,用注射器抽取脓肿物,无菌转移所有抽吸物至厌氧和需氧转运装置中。
● 开放性脓肿:用无菌生理盐水或75%酒精擦拭去除表面分泌物,尽可能采集抽吸物,或将采样拭子插入至病灶的底部或脓肿壁取其新鲜边缘部分。
● 脓疱或水疱:酒精消毒挥发后,挑破脓疱,用拭子收集脓液;较大的脓疱消毒后宜直接用注射器抽取。陈旧的脓疱,去除损伤表面,用拭子擦拭损伤基底。
● 蜂窝织炎液化后宜先注射无菌生理盐水随后抽吸,可以获得足量的标本进行培养。若患者病情迅速进展,或蜂窝织炎没有液化则需要采集组织活检标本。
● 伤口标本:区分浅表伤口标本、深部伤口标本及外科手术伤口标本。宜从感染进展的前缘采集活检标本。活检标本和抽吸物(脓液、渗出液)优于拭子标本;浅表伤口标本不能进行厌氧培养。
● 烧伤伤口:清洁并清除烧伤创面,有液体渗出时,用拭子擦拭取样。烧伤的组织宜做定量培养,定量检验结果≥105 CFU/g则可预示有可能进展为创伤相关脓毒症。
● 溃疡或褥疮:用无菌生理盐水或75%酒精擦拭去除表面分泌物,尽可能采集抽吸物。