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基孔肯雅热实验室检测方案

一、标本的采集

(一)患者标本的采集。

急性期血清:发病1周内,无菌静脉采集非抗凝血5ml。

恢复期血清:发病后2至 3周或以上,无菌静脉采集非抗凝血5ml。

(二)伊蚊标本的采集。

在本病暴发或流行期间,采集疫点的伊蚊成蚊和幼虫,用于病原学检测。

医生正在化验结果.jpg

二、标本的保存与运输

血液标本采集后,在4℃条件下尽快运送至实验室进行血清分离并保存。

血清标本可置于-20℃冰箱短期保存,长期保存须置-70℃以下。

标本运输按照卫生部《人间传染的病原微生物名录》的规定执行。

三、检测方法

常用检测方法主要有3种:血清学检测、核酸检测和病毒分离。一般情况下,病毒分离与核酸检测宜采用发病后1周内的血清; IgM抗体检测宜采用发病4天后的血清,IgG抗体的检测宜采用发病1周后的血清。

(一)血清学检测方法。

  1. 特异性IgM检测。

    采用的方法有:捕获ELISA法(MacELISA)、间接ELISA法、免疫荧光法和免疫层析法等。

  2. 特异性IgG检测。

    采用的方法有:间接ELISA法、免疫荧光法和免疫层析法等。

  3. 意义

    (1)IgM阳性结果,表明患者新近CHIKV感染,用于基孔肯雅热早期诊断。

    (2)IgG阳性结果,表明曾受到CHIKV感染;恢复期血清抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍或4倍以上升高则可确诊。

(二)病原学检测方法。

  1. 基孔肯雅病毒核酸检测。

    一般发病后7日内在多数患者的血清中可检测到病毒核酸。冻存伊蚊标本也可进行基孔肯雅病毒核酸检测。可采用RT-PCR和Real-time RT-PCR等核酸扩增的方法检测。

  2.  病毒分离鉴定。

    常用Vero、C6/36等敏感细胞系开展病毒分离,分离物可以免疫荧光法或核酸检测进行鉴定。

  3. 意义。

    患者血清中分离到基孔肯雅热病毒和/或检测到病毒核酸后,可确诊基孔肯雅热病毒感染。

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